Différents types d’instruments de coagulation adoptent des principes différents. À l’heure actuelle, les principales méthodes de détection sont: méthode de coagulation, méthode de développement de la couleur du substrat, immunodosage, méthode d’agglutination au latex, etc.
1.Méthode de coagulation (méthode biophysique)
La méthode de coagulation consiste à détecter les changements d’une série de grandeurs physiques (lumière, électricité, mouvement mécanique, etc.) du plasma sous l’action de l’activateur de coagulation, puis à analyser les données par ordinateur et à les convertir en résultat final. Par conséquent, il peut également être appelé méthode biophysique.
2. Méthode chromogène du substrat (méthode biochimique)
La méthode chromogène du substrat consiste à déduire le contenu et l’activité des substances mesurées en mesurant le changement d’absorbance du substrat chromogène. Cette méthode peut également être appelée méthode biochimique. Le principe est de synthétiser un petit peptide avec une séquence similaire d’acides aminés aux facteurs de coagulation naturels et contenant un site d’action spécifique, et de connecter le gène chimique qui peut s’hydrolyser et produire de la couleur avec les acides aminés au site d’action. Au cours de la détermination, parce que le facteur de coagulation a l’activité de l’enzyme protéolytique, il peut agir non seulement sur la chaîne peptidique protéique naturelle, mais également sur le substrat de la chaîne peptidique synthétique, de manière à libérer le gène producteur de couleur et à rendre la solution colorée. La profondeur de couleur produite est proportionnelle à l’activité des facteurs de coagulation, de sorte qu’elle peut être quantifiée avec précision. À l’heure actuelle, il existe des dizaines de substrats peptidiques synthétiques, et le plus couramment utilisé est la p-nitroaniline (PNA), qui est jaune et peut être déterminée à une longueur d’onde de 405 mm.
3. méthodes immunologiques
Dans la méthode immunologique, la substance testée purifiée est utilisée comme antigène pour préparer l’anticorps correspondant, puis la substance testée est déterminée qualitativement et quantitativement par réaction d’anticorps antigéniques. Les méthodes courantes sont les suivantes :